Vérification en portée A d’une méthode de PCR en temps réel multiplexe : Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae et Mycoplasma genitalium

Overview & Synopsis

En mars 2017, au laboratoire du centre hospitalier de Beauvais, un appareil de PCR en temps réel est installé. Ce travail décrit la vérification de méthode, en portée A de la trousse de PCR triplexe en temps réel, Urethritis basic®, FTD, pour la détection qualitative de Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae et Mycoplasma genitalium. Pour répondre à la norme NF 15189, une analyse des risques ainsi que la vérification de certains critères de performance ont été réalisées sur site. La fidélité intermédiaire pour N. gonorrhoeae a été évaluée sur 2 échantillons donnant des résultats douteux au premier passage. Lors des passages suivants les résultats sont négatifs. La comparaison avec l’ancienne méthode en point final (GenoQuick®CT, Hain Lifescience) pour la recherche de C. trachomatis a été réalisée sur 46 échantillons. Quatre résultats sont discordants (tous positifs avec l’ancienne méthode et négatifs avec la nouvelle). L’exactitude est vérifiée grâce à deux EEQ pour C. trachomatis et N. gonorrhoeae : les résultats sont conformes. Nos essais de contamination inter- échantillons en alternant échantillons positifs et négatifs ont permis de montrer l’absence de contamination. Enfin, nous avons mis en place une vérification continue à l’aide de représentations de Levey-Jennings construites à partir des « Cycles threshold » des contrôles. Ce travail nous a permis de conclure à l’aptitude de la méthode tout en confirmant l’intérêt de contrôler les échantillons trouvés douteux pour le gonocoque. Il propose également un outil de surveillance continue des performances.