Nouvelle démarche d'identification des sous-populations cellulaires de la moelle osseuse en cytométrie en flux, en un tube huit couleurs

Overview & Synopsis

L’analyse de la moelle osseuse par cytométrie en flux (CMF) fait partie du diagnostic de routine des hémopathies dans un laboratoire d’analyses médicales. La formule leucocytaire et la recherche de populations anormales sont habituellement réalisées au préalable grâce à l’analyse morphologique microscopique sur frottis par un cytologiste averti. Nous proposons ici une combinaison de 8 couleurs en un seul tube, CD3-FITC/ CD10-PE/ CD38-PerCP-Cy5.5/ CD19-PECy7/ CD36-APC/ CD16-APC-H7/ CD34-BV421/ CD45-V500, visant à obtenir ces données grâce à la CMF. Nous avons inclus 99 moelle osseuses, classés en 2 groupes, i) 51 échantillons normaux, provenant de donneurs sains ou de patients avec diverses pathologies et ii) 48 échantillons pathologiques avec des anomalies quantitatives ou qualitatives. L’analyse a été réalisée sur un FACSCanto-II. Dans ce travail, nous proposons une stratégie standardisée d’identification de 14 sous-populations normales, myéloïdes et lymphoïdes. Nous avons validé cette approche de CMF en corrélant les résultats avec ceux de l’analyse morphologique, pour des cellules normales comme pathologiques. Nous montrons que cette approche d’identification et de numération cellulaire est facilement réalisable et très reproductible. Nous proposons aussi une série de critères permettant de détecter les moelles pathologiques et d’orienter vers un panel complémentaire approprié pour l’identification des cellules anormales. En conclusion, cette approche déterminant la composition cellulaire de la moelle osseuse par CMF avec une combinaison 8 couleurs est particulièrement intéressante en raison de sa précision, simplicité, rapidité, et reproductibilité.