Comparaison de biofilms de Candida albicans et de biofilms de C. krusei sur acier inoxydable

Overview & Synopsis

A l’heure actuelle, on estime qu'environ 65% de toutes les infections microbiennes humaines impliquent des biofilms (Ramage et al., 2006). De ce fait, la grande majorité des travaux expérimentaux effectués sur les biofilms de Candida sp., se font avec des supports tels que le silicone, polyéthylène, PVC, élastomère, etc. Néanmoins, d’autres biomatériaux sont aussi utilisés pour des implants prothétiques (résines, métaux c o mme l e titane par exemple). Dans ce cas, les données bibliographiques sont très parcellaires. Notre travail s’axe sur l’utilisation de plaques d’acier inoxydable, pour mimer le développement de Candida sp. en biofilm sur des surfaces inertes, qui engendrent peu d’adhérence des micro-organismes. Deux espèces de Candida ont été testées : C. albicans et C. krusei. Ces espèces sont différentes tant au niveau morphologique (forme filamenteuse versus levuriforme), de l’habitat (commensal versus environnemental), que par leur résistance aux antifongiques. Dans ce contexte, les objectifs de notre étude ont été, de comparer la formation de biofilm monospécifique (constitué d’une seule espèce de levure) de C. albicans versus C. krusei, en fonction de la durée de développement (2, 24, 48, 72 et 96h) et de la température (25, 30 et 37°C). Dans un second temps de voir l’influence que peuvent exercer ces deux espèces de Candida introduites concomitamment pour élaborer alors un biofilm plurispécifique ou mixte. L’influence de ces facteurs (température, durée de développement, densité cellulaire) testés sur la croissance des biofilms monospécifiques de Candida sp., nous ont permis de ne conserver que les paramètres qui permettent un développement optimum des deux espèces dans un biofilm mixte (température de 25°C et temps de développement de 2 à 72h). Lors de l’élaboration de biofilms monospécifiques, les résultats montrent que la croissance des deux espèces de Candida est observée après 24h de développement, quelque soit la température d’incubation. Il faut cependant, attendre 48h pour voir un maximum de développement de ces deux levures agencées en biofilm. L’architecture du biofilm sur le coupon d’acier inoxydable dépend de l’espèce de Candida étudiée. En effet, le biofilm de C. albicans se caractérise par une colonisation hétérogène du support, alors que celle de C. krusei est plus uniforme. Ces expériences de biofilms monospécifiques révèlent aussi que C. krusei se développent moins bien à 25 et 30°C sur coupon d’acier en comparaison à C. albicans (4,5 fois plus de C. albicans à 48h). Lors d’élaboration de biofilms mixtes, il s’avère que C. albicans adhère (2h d’incubation) significativement plus que C. krusei. Si la prédominance de C. albicans s u r C krusei est maintenue à 24h d’incubation, dès 48h le biofilm mixte contient plus de C. krusei que de C. albicans. A 72h, C. krusei colonise très largement le coupon d’acier inoxydable, en quantité 10 fois supérieure à C. albicans. De plus, le nombre de C. krusei en biofilm mixte par rapport au biofilm monospécifique est nettement supérieur dès 24h d’incubation. Par opposition, la quantité de C. albicans en biofilm mixte est très inférieure à celle retrouvée en biofilm monospécifique. Le biofilm mixte de C. krusei et de C. albicans favorise le développement de C. krusei.