Caractérisations biochimiques et structurales d’une métacaspase et d’une enzyme branchante de glucane en alpha-(1,4) chez Candida glabrata

Overview & Synopsis

Les infections causées par diverses espèces Candida ont considérablement augmenté ces dernières années notamment dans un cadre hospitalier où elles entrainent une forte mortalité. Parallèlement à Candida albicans, Candida glabrata est l’une des levures pathogènes ayant la plus forte prévalence chez l’humain. À ce jour, les composés antifongiques utilisés en traitement présentent de nombreux phénomènes de résistance nécessitant l’identification de nouvelles cibles thérapeutiques. Afin d’explorer de nouvelles voies, nous nous sommes intéressés à la métacaspase de C. glabrata. Ces protéases à cystéines sont des homologues structuraux des caspases et des effecteurs de la mort cellulaire régulée, un processus physiologique visant à maintenir l’homéostasie cellulaire chez les métazoaires et les levures. L’étude structurale, fonctionnelle et enzymatique a permis d’élucider le déroulement de la maturation de l’enzyme dans un mécanisme trans avec ses changements structuraux associés, ainsi que son activation, les deux processus étant dépendants de la présence d’ions calcium. Nous avons également étudié une enzyme branchante de glucane en alpha-(1,4) de la sous famille des GH13_8. Ces dernières sont impliquées dans le métabolisme énergétique du glycogène et plus particulièrement dans l’introduction de ramifications via la création de liaisons alpha-(1,6). L’étude biochimique et structurale a permis la résolution de la structure tridimensionnelle de l’enzyme sous une forme libre et en complexe avec un maltotriose. Nous avons également mis en évidence des particularités structurales de l’enzyme propres aux levures et plus particulièrement au phyllum des Saccharomycotina.